上海千实解读《含氨基酸水溶肥料 游离氨基酸的测定 分光光度法》

　　上海千实精密机电科技有限公司：根据广西肥料协会下达的《广西肥料协会关于下达2022年第二批团体标准项目计划的通知》精神，由广西壮族自治区分析测试研究中心提出的《含氨基酸水溶肥料 游离氨基酸的测定—分光光度法》(征求意见稿)标准编写工作已完成。依据《广西肥料协会团体标准管理办法(试行)》有关规定，现向社会公众公开征求意见。

　　本标准按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。参考GB/T 8170 数值俢约规则与极限数值的表示和判断；HG/T 2843 化肥产品 化学分析中常用标准滴定溶液、标准溶液、试剂溶液和指示剂溶液；NY/T 887 液体肥料 密度的测定；NY/T 1975 水溶肥中 游离氨基酸含量的测定等规程编制。

　　本标准规定了水溶肥料中游离氨基酸含量测定的分光光度法的试验方法。本标准适用于液体或固体水溶肥料中游离氨基酸含量的测定。

　　方法原理：

　　试样用活性炭吸附蛋白质和消除色素干扰，用EDTA络合金属元素释放氨基酸，氨基酸与茚三酮反应成蓝色物质，在一定浓度范围内，蓝色溶液的吸光度与氨基酸量成正比例关系，用分光光度法测定出总的氨基酸含量，然后再除以矫正系数，终得到游离氨基酸含量。

　　仪器：

　　1.通常实验室仪器。2.紫外可见分光光度计。3.具塞比色管:10mL。4.玻璃比色皿：1cm。

　　试样的制备：

　　固体样品经多次缩分后，取出约100g，将其迅速研磨至全部通过0.50mm孔径筛(如样品潮湿，可通过1.00mm筛子)，混合均匀，置于洁净、干燥容器中。液体样品经多次摇动后，迅速取出约200mL，置于洁净、干燥的容器中。

　　试样溶液的制备：

　　称取试样1g～5g(精确到0.001g)，置于250mL容量瓶中，用水充分溶解后定容到刻度，摇匀后干过滤，弃去20mL初滤液。取约30mL滤液于小烧杯中，加入一勺(约2g)活性炭搅拌2min，静置5min后干过滤，再用0.45微米的微孔滤膜过滤滤液。准确移取0.50mL滤液于50mL容量瓶中，加入1.0mL EDTA-Na溶液和1.0mL盐酸溶液，用乙酸-乙酸钠缓冲溶液定容，摇匀后干过滤，滤液备用待测。

　　标准曲线的绘制：

　　空白溶液的制备：用移液管依次吸取2.00mL蒸馏水、1.00mL茚三酮溶液、0.50mL抗坏血酸溶液、1.50mL乙酸-乙酸钠缓冲溶液于具塞比色管中，在100℃的沸水中加热15min，取出冷却至室温，摇匀。

　　标准曲线的绘制：用移液管吸取1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL氨基酸标准溶液分别置于4个50mL容量瓶中，用10%异丙醇溶液定容，摇匀。分别用移液管依次吸取2.00mL上述溶液、1.00mL茚三酮溶液、0.50mL抗坏血酸溶、1.50 mL乙酸-乙酸钠缓冲溶液于具塞比色管中，在100℃的沸水中加热15min，取出冷却至室温，摇匀。以空白溶液为参比，于波长573nm出测定各吸光度。以氨基酸标准溶液的浓度为纵坐标，吸光度为横坐标绘制标准曲线。

　　样品的测定：

　　分别用移液管依次吸取2.00mL试样溶液、1.00mL茚三酮溶液、0.50mL抗坏血酸溶液、1.50mL乙酸-乙酸钠缓冲溶液于具塞比色管中，在100℃的沸水中加热15min，取出冷却至室温，摇匀。以空白溶液为参比，于波长573nm处测定样品溶液吸光度，在标准曲线上查得相应的游离氨基酸质量。

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